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旋肉堿（L-肉堿）又稱肉毒堿，是一種水溶性氨基酸，由賴氨酸衍生而來。分子結(jié)構(gòu)為L-γ-胺β-羥丁酸，分子式為 C7H16NO3，分子量為161.2。它是B族維生素類似物，曾被稱為維生素BT。其分子結(jié)構(gòu)中含有一個可供脂肪酸脂化的羥基，其飽和鍵有良好的水溶性和吸濕性，200℃以上它仍穩(wěn)定存在，可在PH3~6的溶液中放置一年以上而不變壞。1998年我國衛(wèi)生部將L-肉堿批準(zhǔn)為食品添加劑，列入 營養(yǎng)強化劑類。我公司利用全新高性能LC-2010液相色譜儀，經(jīng)實踐檢測飼料中L-肉堿的含量，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于飼料中L-肉堿的測定，供廣大用戶參考。

以下是飼料中L-肉堿的詳細(xì)檢測方法。

1　 儀器與試劑

1.1 儀器

　　LC-2010液相色譜儀

　  色譜柱　C18 250mm×4.6mm×5μm

　　實驗室常用儀器設(shè)備

　　超聲波水浴

　　分析天平（感量0.001g）

　　0.45μm水性濾膜

1.2 試劑 

　　異丙醇，色譜純。

　　甲醇，色譜純。

　　乙腈，色譜純。

　　磷酸氫二鈉。

　　磷酸二氫鉀。

　　三乙醇胺。

　　檸檬酸。

　　氧化銀。

　　肉堿衍生劑。

2 　測定原理

樣品經(jīng)加乙醇超聲提取后，然后加入肉堿衍生劑，將衍生物注入液相色譜反相柱上進(jìn)行分離，用紫外檢測器在210nm波長處定量測定。

3 　試樣溶液的制備

稱 取5g試樣于100ml燒杯中，加入30ml無水乙醇，溶解并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，先后用10ml無水乙醇分3次洗滌燒杯，樣液轉(zhuǎn)移至100ml容 量瓶中，超聲提取10min后用無水乙醇定容至刻度，混勻后于4000r/min離心5min。取上清液2ml，加入肉堿衍生劑0.25ml（衍生劑配制 方法：40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈，加入百分之40 氫氧化四丁基銨50 μl），混合后置于60℃恒溫水溫箱120 min，吸取20 μl進(jìn)樣分析。

4　 色譜條件

　　色譜柱：C18 柱　250mm×4.6mm×5μm；

　　流動相：甲醇：磷酸鹽=5:95

　　流速：1.0mL/min；

　　溫度：室溫；

　　進(jìn)樣量：20μL；

　　檢測波長：210nm。

典型譜圖

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